1、可能是色谱柱污染，如用的是C18柱可用水和乙腈多清洗一下，离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显要尽量缩短检测时间，做完后立即清洗色谱柱 。
2、反冲柱子一般是在柱子有污染的时候或是柱压偏高再生时常用到，可换保护柱进行尝试 。
【高效液相出现双峰重叠】3、反冲对柱子损害太大的磷酸盐作流动相时做完一定要用水冲洗干净，磷酸盐要现用现配而且要用0.2微米的滤膜进行过滤使柱压降低，有残留则用水和乙腈多冲洗下即可 。

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